Planen var en duel med den regerende mester Aryna Sabalenka på Arthur Ashe Stadium, men kampen blev aldrig til noget.
Tjekken mærkede smerter i knæet allerede under opvarmningen og besluttede i samråd med turneringens læge at trække sig.
På Instagram forklarede hun, at hun havde gjort alt for at blive klar, men at risikoen for at forværre skaden var for stor.
Hun takkede samtidig publikum og udtrykte håb om at vende tilbage til New York næste år.
Sabalenkas reaktion og semifinalens nye kulør
For Sabalenka betød afbuddet en direkte billet til semifinalen, hvor hun skal møde Jessica Pegula.
Det er en gentagelse af sidste års finale, og dermed får amerikaneren mulighed for at jagte revanche foran hjemmepublikummet.
Selv om vejen til semifinalen blev lettere, udviste Sabalenka forståelse for sin modstanders situation.
<i>Se højdepunkter fra ottendelsfinalen mod Rybakina.</i>
På sine sociale medier sendte hun en varm hilsen til Vondroušová:
- Jeg føler med Marketa efter alt det, hun har været igennem. Nu har hun spillet fantastisk tennis igen, og jeg ved, at det er smertefuldt at måtte trække sig. Pas på dig selv, og jeg håber, du kommer dig hurtigt.
Ifølge The Athletic har Vondroušová kæmpet med flere skader i karrieren, og det er langt fra første gang, hun må sætte drømmen om et langvarigt Grand Slam-forløb på pause.
Hendes Wimbledon-triumf i 2023 står stadig som karrierens største højdepunkt, der desværre endnu ikke er blevet fulgt op af den stabilitet, hun selv og hendes fans havde håbet på.
En karriere præget af både sejre og bump
Den 26-årige tjekke har tidligere gennemgået både håndleds- og skulderoperationer.
På trods af modgangen lykkedes det hende i 2023 at overraske med den samlede sejr i Wimbledon som useedet spiller.
Hendes afbud i New York føjer sig til en række af tidlige exits i store turneringer, ofte forårsaget af netop skader.
For tjekken var det ekstra bittert at forlade US Open efter at have leveret sin bedste præstation i to år mod Rybakina i fjerde runde.